1.植物簡介
枳椇(Hovenia acerba Lindl.),又名拐棗、金鉤梨、萬壽果、金鉤子、雞爪梨等。
2.材料與方法
取剛發芽不久的細嫩葉片,加適量洗滌劑仔細刷洗,再用流水沖洗 0.5-1.0 h 后,在超凈臺上將葉片轉入0.2% 升汞溶液內消毒5-6min,用無菌水沖洗 4-5 次, 然后將葉片切成 1.5cm×1.5 cm 的小塊,接種到愈傷組織誘導培養基上培養。
3.培養基
誘導培養基: (1)1/2MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;
增殖培養基: (2)1/2MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;
生根培養基: (3)1/4MS+NAA0.1 mg/L。
1/2MS 為大量元素減半;1/4MS 為 1/2MS 各元素減半且不添加肌醇。培養基(1)、(2)均添加1.5 g/L聚乙烯吡咯唍酮(PVP)。培養溫度為(25±1)℃; 光照強度為30-40 µmol·m-2·s-1,光照時間為 14 h/d。
4.生長與分化
培養 15-18d后葉片切口處開始出現愈傷組織,30d時愈傷組織誘導率達90%以上,但愈傷組織容易褐化,可以采取在培養基內添加1.5% PVP 和 15 d 繼代 1 次的方法以減輕褐化。在繼代3-4次后,將生長良好的愈傷組織轉入分化增殖培養基上待叢生芽長至 1cm時,可切下繼續進行增殖培養,誘導更多的芽。待苗高3-4 cm時,切取長勢好的無根苗,將其轉接到生根壯苗培養基上進行生根誘導。
5.煉苗移栽
待根數超過5條且苗高有了明顯增高時,微開培養瓶蓋進行煉苗,1d后取出并洗凈根部附著的培養基,移入小粉土中。初期可在苗上方罩一燒杯以保持濕潤,10d后可帶土移栽入大田。
6.意義
枳椇為落葉喬木,目前多為野生狀態,由于種子不易發芽, 野生成林極為罕見。它對土壤和氣候要求不嚴,生長速度快,可作為綠化、退耕還林和水土保持的樹種。采用組織培養技術,可在短期獲得大量種苗,對于種質資源保護及開發利用有一定的參考價值。