1.植物簡介
知母Anemarrhena asphodeloidesBunge為百合科知母屬(單種屬)多年生宿根植物,廣布溫帶地區,多為野生。
2.培養基
分蘗芽增殖培養基:MS+KT 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;
分蘗愈傷組織誘導培養基:MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;
愈傷組織再分化培養基:MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;
生根培養基:1/2MS+NAA 0.5 mg/L。
3.材料與方法
選取無病蟲害、健壯飽滿的種子用飽和洗衣粉浸泡20min左右,取出后再用自來水反復沖洗數次,接著先用75%酒精處理30s后,然后用無菌水沖洗3-4次;再用0.1%升汞處理15min,用無菌水沖洗3-4次,用滅菌的濾紙將種子多余的水分吸干,將種子接種到1/2MS固體培養基上。
4.生長與分化
從知母的無菌苗上切取1.5-2.0cm帶芽的分蘗接種至增殖培養基上,光照強度為1000-2000lx,過一段時間從增殖培養基上切取0.5-1.5cm帶芽的分蘗,接種于愈傷誘導培養基上,黑暗培養,繼代兩次后接種于愈傷組織分化培養基上,光照強度1000-2000lx,待苗子長至一定高度后即可進行生根培養。
5.煉苗移栽
生根培養30d后,在自然光下閉瓶煉苗3d,再打開瓶口煉苗3d,然后洗去組培苗根部附著的培養基,即可移栽到培養缽中。
6.意義
目前國內對知母的組培技術研究較少,本試驗的研究為今后試管苗的工廠化生產提供理論依據和技術基礎。